Número de Chamada
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599.643 D192d DIS
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Autor Principal
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Dantas, Jedna Kato
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Entradas Secundárias - Autor
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Universidade Federal do Pará
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Título Principal
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Desenvolvimento de embriões bubalinos (Bubalus bubalis) cultivados in vitro em diferentes meios / Jedna Kato Dantas; orientador, Otávio Mitio Ohashi
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Publicação
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2002.
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Descrição Física
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xiii, 58, [12] f. : il. color. ; 30 cm
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Notas
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Área de concentração: Medicina e saúde animal
Dissertação (mestrado) - Curso de Pós-Graduação em Ciência Animal, Centro Agropecuário, Universidade Federal do Pará, Belém, 2002
Inclui bibliografia e anexos
Resumo: Este trabalho teve como objetivos: (1) determinar o melhor meio de cultivo para o embrião bubalino associado às células epiteliais do oviduto em suspensão ou células da granulosa folicular, visando o desenvolvimento até o estágio de blastocisto; (2) coletar dados referentes à biometria ovariana; (3) analisar as taxas de recuperação ovocitária, MIV e FIV. Ovários bubalinos foram coletados em abatedouro e transportados até o Laboratório para biometria, os folículos foram obtidos com seringa (20 ml) e agulha (40 x 12), os ovócitos foram levados ao fluxo laminar para seleção e lavagem antes da MIV, onde permaneciam por 24 horas. As células epiteliais do oviducto foram coletas por raspagem, lavadas e cultivadas
em meio de tuba por 24 horas, até a colocação nas gotas de cultivo (B2, TCM199, CR2). As células da granulosa foram obtidas por aspiração de 4-6 folículos maduros sendo lavadas e depositadas nas gotas de cultivo embrionário (TCM199, CR2). O sêmen congelado foi separado por centrifugação durante 25 minutos em coluna de gradiente de Percoll (45 e 90%) e lavado três vezes em meio TALP-Stock por 10 minutos, a 200 G. A concentração espermática foi ajustada para 106 sptzlml e incubados para capacitação em meio de FIV por 2 horas; quando eram adicionados os ovócitos já maduros. Após 18 a 24 horas, os zigotos foram pipetados para desnudamento e divididos nos grupos experimentais: G1 -B2+ 0vid.; G2 - TCM199+0vid.; G3 - CR2+0vid.; G4 - B199+Gran.; G5 -CR2+ Gran. A clivagem era analisada após 72 horas de cultivo, com a primeira renovação do meio (feeding), e novas análises a cada 48 horas, junto com os feedings. Os resultados quanto à biometria ovariana foram 2,53 +ou 0,33 de
comprimento; 1,52+ou- 0,32 de largura; 1,32 +ou- 0,29 cm de espessura e 3,70 +ou- 1,09 g de peso. As médias do número de foIículos, ovócitos recuperados e ovócitos viáveis por ovário foram respectivamente 4,62 +ou-1,41; 2,89 +ou- 1,06 e 1,52 +ou- 0,69. As taxas de MIV e FIV foram de 91 e 67%, respectivamente. As taxas de divagem em G1 a G5 foram de 34,41; 28,52; 51,61; 27,92 e 35,66 % (p>O,05) e de mórula / blastocisto foram de 12,95a,c; 6,16a; 23,49c; 18,02a,b e 18,88b % respectivamente
(p<0,05). A análise estatística dos resultados não mostrou diferença significante entre os grupos quanto à taxa de clivagem, porém o G3 mostrou resultado superior (p
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Assuntos
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Búfalo - Embrião
Fertilização in vitro
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